McCoy’s 5A 培养基，AGCC-10028
产品介绍
McCoy’s 5A Medium 主要为肉瘤细胞的培养所设计，可支持多种（如骨髓、皮肤、肺和脾脏等）的原代移植物的生长，除适于一般的原代细胞培养外，主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纤维细胞、人淋巴细胞、HT-29、BHL-100等上皮细胞。
产品特点
1. 卓越的原代细胞支持能力：配方经过特别优化，能有效促进多种组织来源的原代细胞贴壁和生长，是组织活检样本培养的首选之一。
2. 广泛的细胞适用性：不仅适用于肉瘤细胞、成纤维细胞，对多种上皮细胞、淋巴细胞以及一些难以培养的细胞系也表现出良好的支持效果。
3. 营养成分丰富全面：含有超过40种必需和非必需氨基酸、维生素、核酸衍生物及微量元素，提供了更接近体内生理环境的营养环境。
4. 缓冲能力强：通常与碳酸氢钠配对使用，在5% CO₂ 培养条件下能提供稳定的pH环境，有利于细胞健康生长。
5. 灵活性高：可作为基础培养基，根据特定细胞需求添加不同浓度的血清（如胎牛血清FBS）、生长因子或抗生素，满足个性化培养需求。
使用方法（仅供参考）
1. 完全培养基的配制：
本产品为无菌液体培养基，使用前需补充血清等添加剂。以配制500mL完全培养基为例：
取一袋（或一瓶）McCoy‘s 5A 培养基基础液（粉末需按说明书溶解过滤）。
根据细胞类型，加入 5-20% 的胎牛血清（FBS）。原代细胞建议使用10%-20%的血清浓度，已建系细胞可酌情降低。
根据需要，加入1%的青霉素-链霉素溶液（100 U/mL青霉素 & 100 μg/mL链霉素）以防污染。
混匀后，于2-8°C保存，建议在2-4周内使用完毕。
2. 细胞培养：
细胞接种：用常规细胞消化法处理细胞，重悬于完全培养基中，以适当的密度接种于培养器皿中。
培养条件：将培养器皿置于37°C，5% CO₂ 的饱和湿度培养箱中培养。
换液：根据细胞生长速度，每2-3天更换一次新鲜完全培养基。
传代：当细胞密度达到80%-90%时，按标准流程进行消化传代。
注意事项
1. 无菌操作：所有操作应在超净工作台或生物安全柜中进行，并遵循无菌操作规范，避免微生物污染。
2. 质量控制：建议在使用每批新培养基时，进行细胞生长曲线测定和无菌测试，以确保培养基质量符合要求。
3. 储存条件：未开封的培养基应在2-8°C、避光条件下保存。禁止冷冻或置于高温环境，否则可能导致沉淀形成或营养成分降解。
4. 沉淀问题：培养基在储存或运输过程中可能出现少量沉淀。使用前请轻轻摇晃使其溶解。如果沉淀较多且无法通过摇晃溶解，请勿使用。
5. 血清批次差异：不同品牌和批次的血清存在差异，可能影响细胞生长。建议对血清进行筛选，并在更换批次时进行细胞生长测试。
6. 个人防护：操作时应穿戴实验服和手套，避免培养基与皮肤、黏膜直接接触。
常见问题解答（FAQ）
Q1: McCoy‘s 5A 与 DMEM、RPMI 1640 的主要区别是什么？
A1: McCoy’s 5A 的营养成分比DMEM更丰富，特别是含有更多的氨基酸和维生素，更适合原代和难养细胞。与RPMI 1640相比，McCoy‘s 5A 的缓冲体系略有不同，且最初的设计目标（悬浮淋巴细胞 vs. 贴壁肉瘤细胞）不同，导致其对特定细胞的适应性有差异。
Q2: 培养原代淋巴细胞，推荐使用多少血清浓度？
A2: 对于人外周血淋巴细胞的培养，通常推荐使用10%-15% 的胎牛血清。如果需要刺激淋巴细胞增殖（如使用PHA），可能需要优化至更高浓度。
Q3: 培养基颜色变紫或变黄是什么原因？
A3: 变紫通常意味着培养基偏碱，可能是CO₂浓度不足或培养基盖未拧紧导致CO₂逸出。变黄则意味着培养基偏酸，通常是细胞密度过高、代谢旺盛产生过多酸性产物，或存在微生物污染。请检查细胞状态、培养箱CO₂浓度并进行无菌测试。
Q4: 培养基中出现沉淀，是否还能使用？
A4: 轻微、可摇晃溶解的沉淀通常不影响使用，可能是培养基成分（如磷酸盐、碳酸盐）在低温或pH变化下析出。但如果沉淀量大、呈絮状或无法溶解，则可能意味着培养基已变质或受污染，建议停止使用。
Q5: 如何依据我的细胞类型选择血清浓度？
A5: 对于难培养的原代细胞和刚复苏的敏感细胞，建议使用较高的血清浓度（15%-20%）以提供最佳的生长支持。对于已建系的、生长旺盛的细胞系（如HT-29），可以使用较低的血清浓度（5%-10%）以降低成本并减少血清中不确定因素的干扰。最佳浓度需通过细胞生长实验确定。
产品声明
本产品仅限于科研，如需储存珍贵样本，请自行小规模尝试后大批量实验，产品售后仅限产品本身，无其他任何连带责任，请须知。
本产品仅供研究使用，不适用于临床诊断或治疗。
