产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的细胞上清外泌体提取试剂盒，适用于从细胞培养上清液中快速、高效地分离和纯化外泌体颗粒。外泌体是由细胞分泌的包含 RNA 和蛋白质的小囊泡（30-150 nm），在细胞间通讯中发挥重要作用。本产品采用优化的沉淀法与纯化过滤装置相结合，无需超速离心，即可获得高纯度、结构完整的外泌体颗粒，可用于电镜分析、NTA 粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等下游应用。
【产品特点】
1. 操作简便：无需超速离心机，常规实验室离心机即可完成；
2. 提取高效：优化的沉淀体系，搭配纯化过滤装置，获得高纯度外泌体；
3. 适用广泛：适用于多种细胞（贴壁/悬浮）培养上清液；
4. 无酶无菌：所有组分均无 RNA/DNA 酶，无菌处理，保障下游实验；
5. 保存方便：室温保存，有效期 2 年。
【储存条件】
- 保存：室温（15-30℃）密封保存，有效期 2 年。
- 运输：常温运输，避免高温及阳光直射。
- 注意事项：使用前请充分混匀。若出现沉淀，可 37℃ 水浴加热溶解后使用，不影响效果。
【产品组成】
组分 | 规格（20 T） | 说明 |
Exosome Concentration Solution（ECS试剂） | 100 mL | 无菌，无RNA/DNA酶 |
Exosome Purification Filter（EPF柱） | 20管 | 无菌，无RNA/DNA酶，不可重复使用 |
【自备材料】
- 高速离心机（可达到 10,000 × g 离心力）
- 涡旋振荡器
- 2 mL 离心转子、1.5 mL 离心管
- 1× PBS 缓冲液（无菌）
【使用说明】
1、样品预处理
（1） 取样：冻存样品于 25℃ 水浴解冻后置冰上；新鲜样品直接置冰上。
（2）样品用量：单次提取细胞培养上清液 最少为 20 mL。
（3）去除细胞碎片：4℃ 以 3,000 × g 离心 10 min，取上清。若沉淀较多，可重复离心至无明显沉淀。
（4） 上清转移：将去除碎片的上清液转移至新的 50 mL 离心管中。
2、提取外泌体
（1） 加入 ECS 试剂：按 样品:ECS = 20 mL:5 mL 的比例加入 ECS 试剂。
（2）混合：盖紧管盖，涡旋振荡混匀 1 min，4℃ 静置 至少 2 h（静置时间延长可提高得率，但不超过 24 h）。
（3）沉淀外泌体：4℃ 以 10,000 × g 离心 60 min，弃上清（尽可能吸净）。
（4）外泌体重悬：按 样品:1×PBS = 20 mL:0.2 mL 的比例加入 1× PBS，均匀吹打溶解沉淀，转移至新的 1.5 mL 离心管。
（5） 收集外泌体颗粒：4℃ 以 12,000 × g 离心 2 min，保留上清（富含外泌体颗粒）。若沉淀较多，可重复离心至无明显沉淀。
3、纯化外泌体
（1） 上柱纯化：将收获的外泌体粗品转移至 EPF 柱上室，4℃ 以 3,000 × g 离心 10 min。
（2） 收集纯化外泌体：离心后收集 EPF 柱管底液体，即为纯化后的外泌体颗粒（EPF 柱不可重复使用）。
（3）保存：将纯化后的外泌体以 50-100 μL 分装，保存于 -80℃，备后续实验使用。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 本产品含沉淀剂成分，若出现沉淀属正常现象，使用前充分混匀即可。
3. 操作过程需保持低温（4℃ 或冰上），以保护外泌体完整性。
4. EPF 柱为一次性使用，不可重复使用。
5. 建议新鲜采集的细胞上清立即处理；若需保存，可于 -80℃ 冻存，避免反复冻融。
6. 纯化后的外泌体应尽快进行下游实验或 -80℃ 保存。
7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。