产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 SF488 标记鬼笔环肽（绿色），是一种高亲和力 F-肌动蛋白特异性探针，适用于固定及透化细胞内丝状肌动蛋白（F-actin）的绿色荧光标记与定位研究。鬼笔环肽是从致命毒蕈 Amanita phalloides 中分离的一种环状七肽毒素，能特异性结合 F-肌动蛋白（解离常数 Kd ≈ 20 nM），而不与单体 G-肌动蛋白结合。
本品为 SFluor 488 标记的鬼笔环肽，具有高亮度、光稳定的绿色荧光（Ex/Em ≈ 490/515 nm），染色反应特异性强、对比度高，具有比 Actin 抗体更好的染色效果，效果优于传统 FITC 标记的鬼笔环肽。其小分子量（<2000 Da）使标记的肌动蛋白丝仍保持功能活性，可广泛应用于细胞骨架形态学观察、细胞迁移、细胞极性及细胞信号转导等研究领域。
【产品特点】
1. 高特异性：特异性结合 F-肌动蛋白，不结合 G-肌动蛋白，非特异性染色极低；
2. 高亮度、光稳定：SFluor 488 标记，荧光亮度高，抗光漂白能力强，优于传统 FITC 标记；
3. 物种通用性：结合没有物种差异性，适用性广泛；
4. 功能保持：标记后肌动蛋白丝仍维持许多生理功能，可与肌球蛋白、原肌球蛋白等结合；
5. 兼容性强：与其他荧光染色完全兼容，包括荧光蛋白及其他荧光染料。
【产品组成】
本品为 SF488 标记鬼笔环肽冻干粉（300 T 规格），不含溶剂。使用前需自行配制储液。
【保存条件】
- 冻干粉：-20℃ 干燥、避光保存，有效期 1 年。
- 溶液：若配制成水溶液，请小量分装保存，避免反复冻融。
- 使用前：冻干粉形式，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用。
【使用说明】
1、储液制备
（1） 冻干粉使用前瞬时离心（3000–5000 rpm，1–2 min），将管壁粉末收集至管底。
（2） 取适量甲醇、无菌水、DMSO 或 DMF 溶解冻干粉末，配制成 200 T/mL 储液（300 T 规格建议加入 1.5 mL 溶剂）。
（3）轻柔吹打至完全溶解，分装后 -20℃ 避光保存。
> 注：1 个单位（T）定义为染色一个盖玻片/孔所需染料的量。推荐工作浓度范围为 1:40–1:200（即 200 μL 染色体积中加入 1–5 μL 200 T/mL 储液）。
2、固定细胞染色
以下方案适用于生长在玻璃盖玻片或 8 孔室玻片上的贴壁细胞。
（1） 洗涤：用 PBS 清洗细胞 3 次。
（2） 固定：用含 3.75%–4% 甲醛（不含甲醇）的 PBS 溶液，冰上或室温固定 10–30 min。
> 注意：甲醇会在固定过程中破坏肌动蛋白，务必选用不含甲醇的甲醛固定液。
（3） 洗涤：PBS 清洗细胞 3 次。
（4） 透化：用含 0.5% Triton X-100 的 PBS 溶液，室温透化 5–10 min。
（5）洗涤：PBS 清洗细胞 3 次。
（6） 染色：用 200 μL PBS 稀释 1–5 μL SF488 鬼笔环肽储液，加入盖玻片/孔中，室温避光孵育 20 min。
> 注：孵育期间为避免染液挥发，可将盖玻片置于密封容器内。
（7） 洗涤：PBS 清洗细胞 2–3 次。
（8） 封片观察：可用抗荧光淬灭剂封片后荧光显微镜观察（SF488：Ex/Em ≈ 490/515 nm，可通过标准 GFP/FITC 滤光片检测）。
3、注意事项
- 鬼笔环肽不具有细胞通透性，不推荐用于活细胞染色。
- 本产品适用于甲醛固定的冰冻切片和细胞爬片，也可用于石蜡切片。
- 染色工作液建议现配现用。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 鬼笔环肽具有毒性（LD₅₀ = 2 mg/kg），操作时请穿实验服并戴一次性手套，避免接触皮肤及吸入。
3. 本品为光敏物质，操作及储存需严格避光。
4. 冻干粉溶解后应分装保存，避免反复冻融。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。