产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 FITC 标记鬼笔环肽，是一种高亲和力 F-肌动蛋白探针，适用于细胞骨架 F-肌动蛋白的绿色荧光标记与定位研究。鬼笔环肽是从致命伞形毒蕈蘑菇中分离的一种环状七肽毒素，能特异性结合 F-肌动蛋白，而不与单体 G-肌动蛋白结合。荧光染料标记的鬼笔环肽可在纳摩尔浓度下对 F-actin 进行选择性染色，非特异性染色极低，信噪比优异。
本品 FITC 标记鬼笔环肽发出绿色荧光（Ex/Em ≈ 496/516 nm），具有优异的光稳定性，适用于固定细胞的 F-肌动蛋白染色。其小分子量（<2000 Da）使其标记的肌动蛋白丝仍保持功能活性，可广泛应用于细胞骨架形态学观察、细胞迁移、细胞极性及细胞信号转导等研究领域。
【产品特点】
1. 高特异性：特异性结合 F-肌动蛋白，不结合 G-肌动蛋白，背景极低；
2. 高亲和力：解离常数 Kd ≈ 20 nM，纳摩尔水平即可染色；
3. 物种通用性：结合没有物种差异性，适用性广泛；
4. 功能保持：标记后肌动蛋白丝仍维持许多标记前的功能；
5. 兼容性强：与其他荧光染色完全兼容，包括荧光蛋白及其他荧光染料。
【产品组成】
本品为 FITC 标记鬼笔环肽冻干粉（300 T 规格），不含溶剂。使用前需自行配制储液。
【保存条件】
- 冻干粉：-20℃ 干燥、避光保存，有效期 1 年。
- 溶液：若配制成溶液，请小量分装保存，避免反复冻融。
- 使用前：冻干粉形式，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用。
【使用说明】
1、储液制备
（1）冻干粉使用前瞬时离心（3000–5000 rpm，1–2 min），将管壁粉末收集至管底。
（2） 用甲醇或 DMSO 溶解冻干粉末，配制成 200 T/mL 储液（300 T 规格建议加入 1.5 mL 溶剂）。
（3） 轻柔吹打至完全溶解，分装后 -20℃ 避光保存。
> 注：1 个单位（T）的定义为按照推荐工作液浓度，每次用量为 100–200 μL 染色工作液时，可检测 1 个样品。推荐工作浓度范围为 80–200 nM。
2、固定细胞染色
以下方案适用于生长在玻璃盖玻片或 8 孔室玻片上的贴壁细胞。
（1） 洗涤：用 PBS 清洗细胞 2 次。
（2） 固定：用含 4% 多聚甲醛（不含甲醇）的 PBS 溶液，室温固定 10–30 分钟。
> 注意：甲醇会破坏肌动蛋白，务必选用不含甲醇的甲醛固定液。
（3） 洗涤：PBS 清洗细胞 2–3 次，每次 10 分钟。
（4） 透化：用 0.5% Triton X-100 溶液或预冷丙酮（≤-20℃）处理 5 分钟。
（5） 洗涤：PBS 清洗细胞 2–3 次，每次 10 分钟。
（6） 染色：取 200 μL FITC 鬼笔环肽工作液（用含 1% BSA 的 PBS 稀释储液至工作浓度），覆盖盖玻片上的细胞，室温避光孵育 30 分钟。
（7） 洗涤：PBS 清洗细胞 3 次，每次 5 分钟。
（8） 复染（可选）：使用 DAPI 溶液对细胞核进行复染约 30 秒，PBS 清洗。
（9） 封片观察：用抗荧光淬灭封片剂封片后荧光显微镜观察（FITC：Ex/Em ≈ 496/516 nm）。
3、注意事项
- 鬼笔环肽不具有细胞通透性，不推荐用于活细胞染色。
- 本产品适用于甲醛固定的冰冻切片和细胞爬片，不推荐用于石蜡切片。
- 染色工作液建议现配现用。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 鬼笔环肽具有毒性，操作时请穿实验服并戴一次性手套，避免接触皮肤及吸入。
3. 本品为光敏物质，操作及储存需严格避光。
4. 冻干粉溶解后应分装保存，避免反复冻融。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。