EDTA消化液(0.02%)

 【产品简介】

Augene Tech 的 EDTA 消化液（0.02%）是一种不含胰蛋白酶的细胞消化试剂，适用于贴壁生长细胞的温和消化分散，常用于传代细胞培养及原代细胞培养中组织块的分散处理。本品含 0.02% EDTA 和等渗平衡盐溶液，通过螯合钙、镁离子，削弱细胞间连接，使细胞从培养器皿表面脱落。与胰蛋白酶和胶原酶相比，EDTA 消化液作用温和，对细胞损伤小，特别适用于对酶消化敏感的细胞类型，但其消化能力较弱，贴壁牢固的细胞建议选用胰酶消化液。

 【产品特点】

1. 温和消化：不含胰蛋白酶，对细胞表面蛋白损伤小，细胞活力保持率高；

2. 无菌即用：经 0.22 μm 过滤除菌，可直接使用；

3. 操作简便：室温消化 2-5 分钟，无需 37℃ 预热；

4. 适用广泛：适用于对胰酶敏感的细胞（如神经细胞、干细胞等）的温和消化。

 【储存条件】

- 保存：2-8℃ 保存，有效期 24 个月。

- 运输：常温运输，避免高温及阳光直射。

- 注意事项：本品不含抑菌剂，使用过程中需注意无菌操作，避免微生物污染。

 【产品组成】

本品为 0.02% EDTA 的等渗平衡盐溶液，经无菌过滤，不含胰蛋白酶及抑菌剂。

 【使用说明】

一、贴壁细胞消化

1. 清洗：吸去培养液，用不含钙、镁离子的无菌 PBS 或 Hanks 液洗涤细胞 1-2 次，以去除残余血清（血清中的蛋白会中和 EDTA 的消化作用）。

2. 加入消化液：加入适量 EDTA 消化液，以刚好盖过细胞层为宜（通常 T25 瓶加 1-2 mL）。

3. 消化：室温放置 2-5 分钟，期间可轻轻晃动培养瓶，使消化液均匀覆盖细胞表面。不同细胞类型消化时间有所差异，可在显微镜下观察细胞形态变化（细胞变圆、间隙增大）。

4. 终止消化：显微镜下观察细胞明显收缩，或轻晃培养瓶时细胞可移动，此时吸除消化液（无需收集），加入含血清的完全培养基，用移液器轻柔吹打细胞层，使细胞完全脱落。

5. 收集细胞：将细胞悬液转移至离心管中，用于后续传代或实验。

二、消化不足的处理

- 如果发现细胞未能完全脱落，可加入新鲜 EDTA 消化液重新消化，延长消化时间 2-3 分钟。

三、消化过度的处理

- 若细胞消化时间过长，部分细胞已从培养器皿底部自然脱落，直接用含血清的完全培养基将所有细胞（包括脱落和未脱落的）吹打下来。

- 将细胞悬液转移至离心管中，1000–2000 × g 离心 1 分钟，沉淀细胞，弃去上清（含 EDTA 消化液）。

- 用新鲜完全培养基重悬细胞沉淀，接种至新的培养器皿中。

 【注意事项】

1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。

2. 由于不同组织或细胞性质不同，实验人员应依据具体情况确定最佳消化时间。消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁和生长状态。

3. 本品不含抑菌剂，使用时需特别注意无菌操作，避免消化液被微生物污染。

4. EDTA 消化液适用于贴壁较弱的细胞，对于贴壁牢固的细胞（如成纤维细胞、上皮细胞等），建议选用胰酶消化液。

5. 消化过程中应定期在显微镜下观察，避免消化过度。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。