
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 Protein A/G Magnetic Beads 由高质量重组 Protein A/G 与超顺磁性聚合物微球通过共价偶联制备而成。重组 Protein A/G 融合了 Protein A 的 5 个 Fc 结合结构域和 Protein G 的 2 个 Fc 结合结构域,结合谱更广、结合能力更强。本产品适用于免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP),也可用于抗体纯化及染色质免疫沉淀(ChIP) 等实验。
【产品特点】
1. 结合谱宽广:同时偶联 Protein A 和 Protein G,覆盖常见物种 IgG 亚型。
2. 结合能力强:重组 Protein A/G 包含多个 Fc 结合结构域,结合能力优于单一 Protein A 或 Protein G。
3. 低非特异性结合:经预封闭处理,磁珠不易聚集、背景干净。
4. 操作便捷:磁分离替代传统离心,实验流程更短,适合高通量操作。
5. 适用性广:适用于 IP、Co-IP、ChIP 及抗体纯化等多种实验场景。
【储存条件】
- 保存:2–8℃ 保存,有效期 24 个月。禁止冷冻。
- 运输:冰袋运输,收货后立即 2–8℃ 存放。
- 使用前注意事项:
- 磁珠悬液长期静置后可能出现分层,使用前需充分重悬至均一状态。
- 请勿离心、干燥或冷冻磁珠,以免导致磁珠聚集并失去结合活性。
- 请勿使用超声处理磁珠。
【产品组成】
本品为 Protein A/G 磁珠悬液,1 mL 规格含 0.25 mL 磁珠沉淀,保存于 0.75 mL 含防腐剂的 PBS 中,磁珠含量为 25%(v/v)。
【使用说明】(仅供参考)
1、磁珠准备
(1) 使用前将磁珠悬液充分重悬(颠倒混匀或轻柔涡旋),直至呈均一悬浊液。
(2) 取 25–50 μL 磁珠悬液(含 6.25–12.5 μL 磁珠沉淀)至 1.5 mL 离心管中。
(3) 加入 400–500 μL 结合/洗涤缓冲液(如 1× PBS 或 TBS),轻轻吹打混匀。
(4)将离心管置于磁力架上,静置 10–30 秒至磁珠完全聚集,小心吸弃上清。
(5) 重复洗涤 2 次。
2、抗体结合
(1) 用结合/洗涤缓冲液将抗体稀释至 5–50 μg/mL。
(2) 向洗涤后的磁珠中加入 400 μL 稀释的抗体溶液,轻轻吹打重悬。
(3) 室温旋转孵育 30 分钟,或 4℃ 旋转孵育 2 小时。
(4) 磁分离后,上清为未结合抗体部分(可保留用于后续分析)。
(5) 用结合/洗涤缓冲液洗涤磁珠-抗体复合物 3–4 次,每次磁分离后弃上清。
3、免疫沉淀(IP)
(1) 向磁珠-抗体复合物中加入含目标抗原的样品(400 μL,含 5–50 μg 抗原),轻轻重悬。
(2) 室温旋转孵育 30 分钟,或 4℃ 旋转孵育 2 小时。
(3)磁分离,弃上清。
(4) 用结合/洗涤缓冲液洗涤磁珠-抗体-抗原复合物 5 次,每次 400 μL。
4、洗脱
(1) 磁分离后尽量吸弃上清。
(2)加入 25–50 μL 洗脱缓冲液(如 0.1 M 甘氨酸,pH 2.5–3.0)。
(3)室温旋转孵育 5 分钟。
(4) 磁分离,立即收集上清至含中和缓冲液(如 1 M Tris-HCl,pH 8.5)的新管中,中和至中性 pH。
(5) 洗脱液可直接用于 SDS-PAGE 或 Western Blot 分析。
> 注:所有操作步骤尽可能在 冰上 进行,以避免目标蛋白降解。磁珠使用量可根据样品量及抗体量按比例调整。
【注意事项】
1. 仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 磁珠悬液使用前必须充分混匀,避免磁珠浓度不均。
3. 请勿离心、干燥或冷冻磁珠。
4. 请勿使用超声处理磁珠。
5. 抗体与 Protein A/G 的结合亲和力因种属和亚型而异,建议参考结合特异性表。
6. 洗脱时酸处理时间不宜超过 10 分钟。
7. 配套试剂(裂解液、洗涤缓冲液、洗脱缓冲液等)需实验室自备。
8. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。