真菌清除剂(2000x)

【产品简介】

Augene Tech 的真菌清除剂（2000×），用于防止细胞培养过程中的真菌（包括酵母）污染，还可用于消除细胞培养物中的真菌（含酵母）污染。真菌污染是细胞培养中常见的污染类型之一，污染后培养基常出现浑浊、pH 快速下降、细胞形态改变甚至死亡。本产品疗效远超真菌抗生素两性霉素B，对细胞培养过程中的真菌污染，如白色念珠菌、曲霉、酵母有很好的疗效。经上百种细胞测试和长期实验验证，仅需 1-3 天即可显著抑制真菌生长，一周左右即可有效清除真菌污染。对细胞基本无害，具有高效、特异性杀灭的特点，可高效挽救珍贵细胞。

【产品特点】

1. 高效性：1 天即可有效抑制真菌的增殖；

2. 高特异性：特异性清除真菌污染；

3. 无耐药性：活性成分为多肽类，不会产生耐药性；

4. 高利用率：未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用；

5. 高安全性：对细胞几乎无毒性，已在上百种细胞上验证。

【储存条件】

- 保存：-20℃ 避光保存，有效期 2 年。

- 运输：冰袋运输，收货后立即 -20℃ 存放。

- 注意事项：本产品 -20℃ 保存时不冻结，使用时无需解冻，直接从 -20℃ 取出即可使用。【产品组成】

真菌清除剂（2000× 浓缩液，0.1 μm 过滤除菌）。

【使用说明】

1、操作步骤

（1） 从 -20℃ 取出真菌清除剂，瞬时离心（3000 rpm，3-5 s），用 75% 酒精喷洒管外壁消毒，在生物安全柜中无菌操作。

（2）按选定浓度将清除剂直接加入细胞培养基中，轻轻混匀。

（3） 连续加药培养 1-2 周，期间按细胞生长情况正常换液或传代（每次均需加入含药培养基）。

（4）连续加药培养 2 周（或 3 次传代）后，检测是否还存在真菌污染。

加药示例（以 T25 培养瓶，6 mL 培养基为例） ：

2、浓度选择参考

不同细胞类型对清除剂的耐受度不同，建议根据下表选择合适的稀释倍数：

> 注：若不确定细胞耐受度，建议从 2000× 开始尝试，观察细胞状态后再逐步调整。

3、污染严重时的浓度优化方案

若真菌污染较严重，建议设置 500×、1000×、2000× 三个浓度梯度进行测试：

- 若 500× 对细胞生长无明显影响，建议采用 500× 进行清除；

- 若 500× 对细胞生长有明显影响，则采用 1000× 进行清除；

- 若 1000× 仍有影响，则采用 2000× 进行清除，并适当延长清除时间。

- 连续加药培养 2 周（或 3 次传代）后检测是否还存在真菌污染；若仍有污染，可继续培养 1 周。

4、预防使用

若细胞需连续培养，建议每 2-3 周进行定期预防。推荐使用 3000× 稀释倍数（如 6 mL 培养基加入 2 μL 清除剂），连续加药培养 1-2 周（或 3 次传代）后即可有效防止真菌污染或抑制真菌增殖。

5、操作注意事项

（1）细胞换液/传代前处理

大部分真菌存在于细胞表面、细胞间隙和培养基中。换液或传代前，弃去污染培养基，用无菌 PBS 轻轻冲洗细胞表面 2-3 次，可将部分真菌去除。

（2）低速离心分离

大部分真菌直径小于细胞。传代后，500 rpm 低速离心，容易将细胞和污染物分离，弃上清即可去除部分真菌，铺细胞需更换为新的培养瓶/板。

（3）贴壁细胞加药时机

若贴壁细胞污染严重，采用高浓度药物（500×-1000×）清除污染时，传代后为防止药物影响细胞贴壁，建议待大部分细胞贴壁后再加入药物。即先用完全培养基重悬细胞铺瓶，0.5-2 小时后再加入对应稀释倍数的真菌清除剂。

（4） 传代换新瓶

传代时换用新的培养瓶，可有效规避旧培养瓶壁上残留的真菌污染。

（5） 撤药时机

确认真菌污染清除干净后，建议再进行 1-2 次加药传代维持，方可撤掉清除剂，避免残留造成二次污染。

6、含药培养基保存

- 含药培养基建议现配现用。

- 若未用完，可于 4℃ 避光保存，建议2周内使用完毕，使用前需预热至 37℃。

 【注意事项】

1. 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。

2. 浓度选择：不同细胞耐受度不同，如遇个别细胞对本试剂敏感，细胞生长速度明显受影响时，建议减量使用或进行稀释度测试。

3. 双抗使用：加入本产品进行真菌清除时，无需额外添加双抗（青霉素-链霉素） 。

4. 再次污染预防：真菌清除剂处理后会有很好的清除效果，但如果环境或使用试剂中仍有污染源存在，细胞可能会再次污染，需做好适当的预防措施。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 由于科研实验本身存在极大的不确定性和探索性，产品售后仅限产品本身，不承担其他任何连带责任，请使用者悉知。