产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的罗丹明标记鬼笔环肽，是一种高亲和力 F-肌动蛋白探针，适用于细胞骨架 F-肌动蛋白的荧光标记与定位研究。鬼笔环肽是从致命伞形毒蕈蘑菇中分离的一种双环肽毒素，能特异性结合 F-肌动蛋白，而对 G-肌动蛋白无亲和力。荧光染料标记的鬼笔环肽可在纳摩尔水平染色 F-肌动蛋白，非特异性染色极低，信噪比高。
本品罗丹明标记鬼笔环肽（红色荧光）具有优异的光稳定性，适用于固定细胞的 F-肌动蛋白染色。其小分子量（<2000 Da）使其标记的肌动蛋白丝仍保持功能活性，可与肌球蛋白、原肌球蛋白等多种肌动蛋白结合蛋白相互作用，广泛应用于细胞骨架形态学观察、细胞迁移、细胞极性及细胞信号转导等研究领域。
【产品特点】
1. 高特异性：特异性结合 F-肌动蛋白，不结合 G-肌动蛋白，背景极低；
2. 高亲和力：纳摩尔水平即可染色，信噪比优异；
3. 物种通用性：结合亲和力在不同物种间差异小，适用性广；
4. 功能保持：标记后肌动蛋白丝仍保持功能活性，可继续参与收缩和运动；
5. 光稳定性好：罗丹明标记具有较好的光稳定性，便于荧光成像。
【产品组成】
本品为罗丹明标记鬼笔环肽冻干粉（300 T规格），不含溶剂。使用前需自行配制储液。
【保存条件】
- 冻干粉：-20℃ 干燥、避光保存，有效期 1 年。
- 溶液：若配制成水溶液，请小量分装保存，避免反复冻融。
- 使用前：冻干粉形式，使用前请瞬时离心，加适当溶剂溶解后使用。
【使用说明】（仅供参考）
1、储液制备
（1） 冻干粉使用前瞬时离心（3000–5000 rpm，1–2 min），将管壁粉末收集至管底。
（2）用甲醇或无菌水溶解冻干粉末，配制成 200 T/mL 储液（300 T规格加入 1.5 mL 溶剂）。
（3） 轻柔吹打至完全溶解，分装后 -20℃ 避光保存。
> 注：1 个单位（T）定义为染色一个盖玻片/孔所需染料的量。推荐工作浓度范围为 1:40–1:200（即 200 μL 染色体积中加入 1–5 μL 储液）。
2、固定细胞染色
以下方案适用于生长在玻璃盖玻片或 8 孔室玻片上的贴壁细胞。
（1） 洗涤：用 PBS 清洗细胞 3 次。
（2） 固定：用含 4% 甲醛（不含甲醇）的 PBS 溶液，室温固定 20 分钟。
> 注意：甲醇会破坏肌动蛋白，务必选用不含甲醇的甲醛固定液。
（3）洗涤：PBS 清洗细胞 3 次。
（4） 透化：用含 0.4% Triton X-100 的 PBS 溶液，室温透化 10 分钟。
（5） 洗涤：PBS 清洗细胞 3 次。
（6）染色：用 200 μL PBS 稀释 1–5 μL 罗丹明鬼笔环肽储液，加入盖玻片/孔中，室温避光孵育 20 分钟。
> 注：孵育期间为避免染液挥发，可将盖玻片置于密封容器内。
（7） 洗涤：PBS 清洗细胞 2–3 次。
（8） 封片观察：可用抗荧光淬灭剂封片后荧光显微镜观察（罗丹明：Ex/Em ≈ 540/565 nm）。
3、活细胞染色（可选）
荧光标记鬼笔环肽不具有细胞透性，通常不用于活细胞标记。若需活细胞标记，可通过胞饮作用或显微注射方式引入，且需使用更高浓度的染料。
4、注意事项
- 本产品不推荐用于石蜡切片的染色。
- 适用于冰冻切片和细胞爬片的 F-肌动蛋白染色。
【注意事项】
1. 仅限科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
2. 鬼笔环肽对人体有毒，操作时请穿实验服并戴一次性手套，避免接触皮肤及吸入。
3. 本品为光敏物质，操作及储存需严格避光。
4. 冻干粉溶解后应分装保存，避免反复冻融，4℃ 短期可保存 1–2 周。
5. 染色工作液建议现配现用。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。