
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的 ATP 发光法细胞活力检测试剂盒基于高灵敏度生物发光检测技术,通过对 ATP 进行定量以测定培养物中活细胞数目及细胞活力。ATP 是细胞新陈代谢的一个重要指标,其与活细胞数目呈良好的线性关系,是细胞活力检测的重要标志性分子。
ATP 生物发光技术的原理为:荧光素酶以荧光素、三磷酸腺苷(ATP)和 O₂为底物,在 Mg²⁺存在时,可将化学能转化为光能。在荧光素酶催化的发光反应中,ATP 在一定的浓度范围内,其浓度与发光强度呈线性关系,即发光值与 ATP 浓度呈正比,ATP 与活细胞数成正比。
基于此,本试剂盒可通过 ATP 含量进行细胞计数或活力测定,且不受化合物自发荧光的影响。
【产品特点】
1. 高灵敏度:可检测低至 10 个细胞的 ATP 水平,线性范围宽;
2. 操作简便:无需洗涤细胞,直接加样检测,均质发光,信号稳定;
3. 快速高效:加入检测试剂后 10 分钟内即可完成检测;
4. 不受荧光干扰:生物发光法,无化合物自发荧光干扰;
5. 宽动态范围:线性范围可达 4-6 个数量级。
【储存条件】
1. 保存:-20℃ 避光保存,有效期 1 年。
2. 运输:干冰运输,收货后立即 -20℃ 存放。
3. 注意事项:避免反复冻融,建议分装保存。本产品对光敏感,需避光保存及操作。
【产品组成】
本试剂盒为单瓶即用型ATP检测工作液,含荧光素酶、荧光素及Mg²⁺等组分,每瓶100 mL,-20℃避光保存。
【使用说明】
1、试剂准备
从 -20℃ 取出检测工作液,完全解冻后冰上放置,避免反复冻融。
2、标准曲线制备(可选)
用PBS或培养基梯度稀释ATP标准品(10 nM–10 μM),每孔100 μL,同法检测,绘制标准曲线。
3、细胞样品检测
1.96孔板每孔加入 100 μL 细胞悬液(贴壁或悬浮细胞均可,无需洗涤)。
2.室温平衡 10-20 min。
3.每孔加入 100 μL 检测工作液,轻柔吹打混匀。
4.室温避光孵育 5-10 min。
5.化学发光仪或酶标仪(发光模块)读取RLU值。
对照设置:空白对照(培养基+工作液,无细胞)+ 复孔(≥3个)
4、结果计算
细胞活力(%) = (实验组RLU – 空白RLU)/(对照组RLU – 空白RLU)× 100%
【注意事项】
1.仅限科研使用,不得用于临床诊断或治疗。
2.操作全程避光,避免发光信号衰减。
3.检测工作液使用前应完全解冻,解冻后须充分混匀,但不可剧烈振荡。
4.加样时应避免产生气泡,气泡会影响发光值读数。
5.检测板应使用不透明白色或黑色 96 孔板(推荐白色板),避免孔间信号干扰。
6.血清和培养基中的 ATP 可能影响背景值,建议设置无细胞空白对照排除干扰。
7.建议进行预实验,确定最佳细胞接种密度及检测线性范围。
8为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。