
产品详情
【产品简介】
Augene Tech 的“黑胶虫”清除剂(2000×),适用于清除细胞培养中因“黑胶虫”污染导致的细胞状态变差、生长缓慢等问题。“黑胶虫”是一种常见的细胞污染物,在显微镜下呈布朗运动,培养基不浑浊但营养消耗快,严重时导致细胞空泡化甚至死亡。本产品经数百种细胞测试验证,仅需 1-3 天即可显著抑制“黑胶虫”生长,1 周左右有效清除,且对细胞生长无明显影响,可高效挽救珍贵细胞。
【产品特点】
1. 高效清除:1-3 天显著抑制“黑点”生长,1 周左右有效清除;
2. 特异性强:高效特异性清除“黑胶虫”污染,不影响细胞正常生长;
3. 适用性广:经数百种细胞测试验证,适用于多种细胞类型;
4. 浓度可调:2000× 浓缩液,可根据污染程度灵活调整使用浓度;
5. 即用型:0.1 μm 过滤除菌,-20℃ 保存不冻结,无需解冻,直接加入培养基使用。
【储存条件】
- 保存:-20℃ 避光保存,有效期 2 年。
- 运输:干冰或冰袋运输,收货后立即 -20℃ 存放。
- 注意事项:本产品 -20℃ 保存时不冻结,使用时无需解冻,从 -20℃ 取出即可直接使用。
【产品组成】
“黑胶虫”清除剂(2000× 浓缩液,0.1 μm 过滤除菌,含专利保护成分)。
【使用说明】
1、浓度选择参考
不同细胞类型对清除剂的耐受度不同,建议根据下表选择合适的稀释倍数:
细胞类型 | 细胞对药物敏感度 | 细胞举例 | 建议稀释倍数 |
细胞系(类成纤维样) | * | 293T、Raw264.7、HT22、3T3-L1、HSF、C2C12、L929 | 500×~2000× |
细胞系(上皮样) | ** | MCF-7、Hep G2、Hela、HUVEC | 1000×~2000× |
原代细胞(成纤维样) | 成纤维细胞、间质细胞 | ||
原代细胞(上皮样) | *** | 上皮细胞、内皮细胞、肿瘤细胞 | 1500×~2000× |
干细胞(成纤维样) | 间充质干细胞 | ||
胚胎干细胞(克隆样) | **** | H1、H9、iPS | 2500×~4000× |
温馨提示:若不确定细胞耐受度,建议从 2000×–3000× 开始尝试,观察细胞状态后再逐步调整。
2、操作步骤
(1) 从 -20℃ 取出清除剂,瞬时离心(3000 rpm,3-5 s),用 75% 酒精喷洒管外壁消毒,在生物安全柜中无菌操作。
(2)按选定浓度将清除剂直接加入新鲜细胞培养基中,轻轻混匀。
(3) 连续加药培养 1-2 周,期间按细胞生长情况正常换液或传代(每次均需加入含药培养基)。
加药示例(以 T25 培养瓶,6 mL 培养基为例) :
稀释倍数 | 2000× | 1000× | 500× |
6mL培养基加入量 | 3μL | 6μL | 12μL |
3、污染严重时的浓度优化方案
若黑胶虫污染较严重,建议设置 500×、1000×、2000× 三个浓度梯度进行测试:
- 若 500× 对细胞生长无明显影响,建议采用 500× 进行清除;
- 若 500× 对细胞生长有明显影响,则采用 1000× 进行清除;
- 若 1000× 仍有影响,则采用 2000× 进行清除,并适当延长清除时间。
4、操作注意事项
(1) 贴壁细胞处理
- 换液或传代前,弃去旧培养基,用含 1000× 清除剂 的 PBS 轻轻冲洗细胞表面 2 次。
(2) 悬浮细胞/半贴壁细胞处理
- 换液或传代前,利用黑胶虫直径远小于细胞直径的特点,采用 150×g(约 900 rpm)低速离心 5 分钟,弃去旧培养基,再用含 1000× 清除剂的 PBS 轻轻冲洗细胞 2 次。
(3) 传代换新瓶
- 传代时换用新的培养瓶,可有效规避旧培养瓶壁上残留的“黑胶虫”污染。
(4)撤药时机
- 显微镜下确认“黑胶虫”清除干净后,必须进行传代并铺入新的细胞培养瓶,且在新瓶中加药维持 1-2 天 后,方可撤掉清除剂,避免旧瓶壁残留造成二次污染。
5、含药培养基保存
- 含药培养基建议现配现用。
- 若未用完,可于 4℃ 避光保存,建议 2 周内 使用完毕。
【注意事项】
1. 本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或治疗。
2. 浓度选择:不同细胞耐受度不同,建议从 2000×–3000× 稀释开始尝试,避免造成不必要的损失。
3. 双抗使用:加入本产品进行“黑胶虫”预防和清除时,无需添加双抗(青霉素-链霉素)。
4. 细胞状态判断:细胞老化或状态异常时会产生黑色细胞分泌物,此类分泌物会随培养不断产生,并非“黑胶虫”,无法通过本产品有效去除。
5. 再次污染预防:“黑胶虫”污染原理尚不清楚,若环境、耗材、试剂中仍有污染源存在,清除后的细胞可能再次污染,需做好适当的预防措施。
6. 细胞生长抑制:若加入本产品后细胞生长速度明显减慢,请降低药物浓度尝试,必要时停止使用。
7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
8. 由于科研实验本身存在极大的不确定性和探索性,产品售后仅限产品本身,不承担其他任何连带责任,请使用者悉知。