支原体高效清除剂（1000×）

【产品简介】

Augene Tech 的支原体高效清除剂（1000×），适用于清除细胞培养过程中因支原体污染导致的细胞状态变差、生长缓慢等问题。支原体是细胞培养中最常见的污染物之一，直径约为 0.1–0.3 μm，具有变形能力，可透过常见过滤膜（0.22–0.45 μm），常规无菌过滤方法不能将其去除，常用的抗生素也对支原体无效。支原体污染来源广泛，可通过细胞间交叉污染、操作人员的口腔及皮肤、血清等添加物带入。由于支原体无法通过常规光学显微镜观察到，不会引起培养基混浊，因此细胞被支原体污染一般难以察觉。

支原体会消耗必需氨基酸，影响细胞生长速率，造成代谢物累积，改变细胞形态，影响 DNA、RNA、蛋白质的合成，抑制细胞因子表达，改变被污染细胞的基因表达谱，诱导染色体畸变。

本产品经上百种细胞测试和长期实验验证，仅需 12 小时 即可显著抑制支原体生长，1-2 周 左右即可有效清除支原体污染，且不影响细胞本身的代谢，完美兼具特异性和高效清除支原体的特点，特别适合细胞株/系中顽固和特殊类型支原体的清除，最大程度上挽救珍贵细胞。

 【产品特点】

1. 高效性：12 小时即可有效抑制支原体增殖；

2. 高特异性：特异性清除支原体，不影响细胞正常生长；

3. 无耐药性：活性成分为多肽类，不会产生耐药性；

4. 高利用率：未被利用的成分可降解为氨基酸被细胞利用；

5. 高安全性：对细胞几乎无毒性，已在上百种细胞上验证；

6. 适用性广：适合支原体久杀不净、污染耐药支原体、污染多种类支原体、污染特殊类型支原体、支原体反复复发的细胞。

 【储存条件】

- 保存：4-8℃ 避光保存，有效期 2 年。

- 运输：冰袋运输，收货后立即 4-8℃ 存放。

- 注意事项：长时间光照会导致失效，需避光保存。

 【产品组成】

支原体高效清除剂（1000× 浓缩液，0.1 μm 过滤除菌）。

 【使用说明】

1、清除支原体污染操作规程

（1）操作步骤

a. 从 4-8℃ 取出支原体高效清除剂，瞬时离心（3000 rpm，3-5 s），用 75% 酒精喷洒管外壁消毒，在生物安全柜中无菌操作。

b. 按推荐浓度将清除剂直接加入新鲜完全培养基中，轻轻混匀。

c. 连续加药培养 1-2 周（或传代 3 次），期间按细胞生长情况正常换液或传代（每次均需加入含药培养基）。

d. 处理结束后，建议使用 PCR 法检测是否还存在支原体污染。如果还存在支原体污染，可继续培养 1 周。

（2） 浓度选择参考

污染严重时的浓度优化方案：

若支原体污染较严重，可酌情增加药物浓度以提高清除效率。推荐设置 500×、1000×、2000× 三个浓度梯度进行测试：

- 若 500× 对细胞生长无明显影响，建议采用 500× 进行清除；

- 若 500× 对细胞生长有明显影响，则采用 1000× 进行清除。

（3） 操作注意事项

a. 贴壁细胞处理：换液或传代前，弃去旧培养基，用 PBS 轻轻冲洗细胞表面 2 次。

b. 及时传代：若细胞达到可传代比例，请及时传代并铺入新的细胞培养瓶，换新瓶的过程也可有效规避培养瓶壁上残留支原体的污染。

c. 撤药时机：PCR 检测确认支原体清除干净后，必须进行传代并铺入新的细胞培养瓶，且在新瓶中加药维持 1-2 天 后，方可撤掉清除剂，避免旧瓶壁残留造成二次污染。

2、预防支原体污染操作规程

若细胞需长时间培养或存在共用液氮罐的情况，建议每 2-3 周进行定期预防。

连续加药培养 1-2 周，即可有效防止支原体污染或抑制支原体增殖。

3、含药培养基保存

- 含药培养基建议 现配现用。

- 若未用完，可于 4℃ 避光保存，建议 2 周内 使用完毕。

 【质量控制】

- 通过支原体、真菌、细菌、内毒素检测；

- 通过渗透压、pH 检测；

- 通过产品性能检测。

 【注意事项】

1. 本产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。

2. 浓度选择：若个别细胞对本试剂敏感，细胞生长速度明显受影响时，建议减量使用或进行稀释度测试。

3. 双抗使用：加入本产品进行支原体清除时，无需额外添加双抗（青霉素-链霉素）。

4. 再次污染预防：支原体清除剂处理后会有很好的清除效果，但如果环境或使用试剂中仍有污染源存在，细胞可能会再次污染，需做好适当的预防措施（如定期消毒细胞房、生物安全柜、培养箱等）。

5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6. 由于科研实验本身存在极大的不确定性和探索性，产品售后仅限产品本身，不承担其他任何连带责任，请使用者悉知。