贴壁细胞培养皿150mm,AGCC-00150
产品介绍
本产品为150mm 贴壁细胞培养皿,专为贴壁细胞的高效培养、扩增和操作而设计。培养皿采用高品质聚苯乙烯(PS)材料制成,经真空等离子表面处理,使其具有亲水性,能够促进细胞外基质蛋白的吸附,从而显著增强细胞的贴壁能力与铺展效率。产品适用于常规细胞传代、原代细胞分离培养及大规模细胞扩增等实验。
产品特点
- 优质材料:选用光学透明的聚苯乙烯(GPPS)材质,透光性极佳,便于显微镜下直接观察细胞生长状态。
- 表面处理:经真空等离子(TC处理)表面改性,亲水性好,细胞贴壁牢固。
- 无菌保障:经γ射线辐照灭菌,无DNase/RNase,无热原,无细胞毒性。
- 人性化设计:
- 堆叠设计:皿盖边缘凸起设计,便于稳定堆叠存放与转运。
- 通气栅设计:盖子上设有透气槽或通气栅,确保气体交换稳定,减少冷凝水聚集。
- 书写区域:部分型号设有标识区,便于标记细胞类型、日期及实验人员。
使用方法(仅供参考)
1. 准备工作
- 将培养皿从包装中取出前,建议在生物安全柜中拆开外层包装。
- 提前预热完全培养基至适宜温度(通常为37℃)。
2. 接种细胞
- 计算接种量:根据细胞类型和实验需求,确定合适的细胞接种密度。
- 一般传代建议:按 1:2 至 1:5 的比例传代,或按每平方厘米培养面积接种 1 x 10⁴ - 5 x 10⁴ 个细胞。
- 加入培养基:向培养皿中加入 20 - 35 mL 的完全培养基。
- 参考标准:一般推荐每平方厘米生长面积使用 0.2 - 0.4 mL 培养基。
- 加入细胞悬液:将制备好的细胞悬液均匀滴入培养皿中,轻轻“十”字摇晃或“8”字摇晃,使细胞分布均匀。
3. 培养条件
- 将培养皿水平放入 37℃、5% CO₂ 的培养箱中。
- 注意:培养箱内应保持湿度饱和,以防止培养基蒸发。
4. 细胞观察与换液
- 观察:次日观察细胞贴壁情况及形态。
- 换液:根据细胞生长速率和培养基颜色变化,每 2 - 3 天更换一次新鲜培养基。换液时,小心吸弃旧培养基,沿皿壁缓慢加入新鲜预热的培养基,避免吹打细胞层。
5. 传代或收获
- 当细胞汇合度达到 80% - 90% 时,即可进行传代或收获操作。
注意事项
1. 无菌操作:操作时应在生物安全柜中进行,佩戴实验服和手套,避免污染。
2. 防止污染:培养皿已灭菌,若包装破损或漏气,请勿使用。
3. 平衡适应:开启包装后若未立即使用,请置于无菌环境下,避免长时间暴露于光照或紫外线下。
4. 避免冷凝水:从培养箱取出培养皿时,为避免皿盖上冷凝水滴落,可倾斜片刻让水珠流下。
5. 处理原则:培养皿仅供一次性使用,用后请按生物废弃物处理规范丢弃。
常见问题解答
Q1:为什么我的细胞在150mm培养皿中贴壁不好?
A:细胞不贴壁可能由多种原因引起:
- 表面处理问题:请确认使用的是TC处理(贴壁培养专用)的培养皿。
- 胰蛋白酶过度消化:消化时间过长或胰酶浓度过高,损伤细胞膜蛋白,导致贴壁能力下降。
- 培养基pH异常:培养基过碱(偏紫)或过酸(偏黄)会影响细胞状态。
- 支原体污染或细胞老化:建议检测支原体或使用低代次细胞。
- 建议:可进行平行实验对比批次差异,同时确保血清质量良好。
Q2:150mm培养皿应该加多少培养基?
A:建议工作容积为 20 - 35 mL。具体取决于细胞类型和培养时间。一般推荐每平方厘米 0.2 - 0.4 mL,该皿表面积约 145 cm²,故推荐 29 - 58 mL 之间,但实际操作中常用 20 - 35 mL 以避免培养基过多影响气体交换。
Q3:皿盖上为什么会有冷凝水?
A:由于培养箱内湿度较高且温度恒定,皿盖内侧产生少量冷凝水属于正常现象。本产品的透气栅设计有助于减少大量冷凝水的形成。若水珠较多,可轻轻倾斜或用无菌纸巾吸干。
Q4:培养皿的保质期是多久?
A:不同品牌略有差异,通常为 2 年至 5 年。具体有效期请参考包装标签。
Q5:我可以使用该培养皿进行悬浮细胞培养吗?
A:虽然主要设计用于贴壁细胞,但也可以用于悬浮细胞培养。不过,如果长期培养悬浮细胞,使用未处理表面或低吸附培养皿效果更佳,可避免细胞非特异性贴壁。
Q6:如何堆叠培养皿进行批量培养?
A:该培养皿的皿盖边缘经过特殊加固设计,具有堆叠功能。在确保平稳的前提下,可以安全堆叠 2 - 3 个培养皿,便于放入同一培养箱托盘进行大规模培养。
产品声明
本产品仅限于科研,如需储存珍贵样本,请自行小规模尝试后大批量实验,产品售后仅限产品本身,无其他任何连带责任,请须知。
本产品仅供研究使用,不适用于临床诊断或治疗。